CHINA CN112220919A : PATENTAANVRAAG VOOR GEBRUIK VAN GRAFEEN OXIDE IN CORONA VACCINS

Patentaanvraag ingediend op 27 september 2020. Gepubliceerd op 15 januari 2021. Status : hangende.

https://patents.google.com/patent/CN112220919A/en

Abstract

De uitvinding behoort tot het gebied van nanomaterialen en biogeneeskunde, en heeft betrekking op een vaccin, in het bijzonder op de ontwikkeling van 2019-nCoV coronavirus nucleair recombinant nanovaccin. De uitvinding omvat ook een bereidingsmethode van het vaccin en de toepassing van het vaccin in dierproeven. Het nieuwe coronavirusvaccin bevat grafeenoxide, carnosine, CpG en nieuwe coronavirus RBD; binding van carnosine, CpG en neocoronavirus RBD op de ruggengraat van grafeenoxide; de CpG-coderingssequentie wordt weergegeven als SEQ ID NO 1; het nieuwe coronavirus RBD verwijst naar een nieuw coronavirus proteïne receptor bindend gebied dat een hoog-titer specifiek antilichaam kan genereren gericht op het RBD in een muizenlichaam.

Beschrijving

Nano coronavirus recombinant vaccin met grafeenoxide als drager

Technisch gebied

Het vaccin is een ultiem wapen voor het elimineren van belangrijke besmettelijke ziekten, heeft de voordelen van de laagste kosten en meer voordelen van eerdere vijand dan andere therapieën, wordt ongetwijfeld hoopgevend voor het publiek, de pokken worden door mensen geëlimineerd door vaccinatie, de gevallen van poliomyelitis worden met 99 procent verminderd, de besmettelijke ziekten zoals difterie zijn zeldzaam, en de incidentie van ziekten zoals mazelen, neonatale tetanus en dergelijke wordt opmerkelijk verminderd. Het effect van vaccins op de menselijke gezondheid is niet overdreven, en de geboorte van elk nieuw vaccin is een grote overwinning voor de mens om een besmettelijke ziekte te overwinnen! Tot op heden is geen enkele medische behandeling in staat geweest een zo belangrijk, blijvend en diepgaand effect op de menselijke gezondheid te hebben als een vaccin; evenmin is er een therapie beschikbaar waarmee een ziekte van de aarde kan worden uitgebannen tegen de minimale kosten van een vaccin.

Na het uitbreken van de SARS-CoV-2-epidemie hebben verschillende laboratoria in China de isolatie van virusstammen voltooid, en om een grote stap voorwaarts te maken in de ontwikkeling van vaccins, geloven wij dat wij binnenkort een definitief wapen zullen hebben voor de uitroeiing van SARS-CoV-2, maar tot nu toe is er geen goedgekeurd vaccin of geneesmiddel voor de behandeling van CoV-infectie, en er is grote behoefte aan de ontwikkeling van een doeltreffend geneesmiddel voor de behandeling of preventie van coronavirusinfectie en -uitbraak.

Volgens het onderzoek van coronavirusvaccins zoals tegen SARS en MERS is het belangrijkste doelwit van het bestaande coronavirusvaccin het S-eiwit van het coronavirus. Vaccins moeten niet alleen humorale en cellulaire immuunreacties opwekken, maar ook mucosale immuunreacties, en met behulp van hulpstoffen evenwichtige Th1- en Th2-trajecten opwekken om werkelijk doeltreffende vaccins te produceren. Momenteel richt het onderzoek naar meer SARS- en MERS-vaccins zich voornamelijk op virale vectorvaccins en subunitvaccins, en uit een groot aantal onderzoeken blijkt dat het probleem van SARS en MERS erin bestaat dat B-cellen met langetermijngeheugen niet kunnen worden gestimuleerd om zich aan te maken, de langetermijngeheugencellen in de genezen SARS- en MERS-patiënten kunnen slechts 2-3 jaar meegaan, immunologisch geheugen kan niet worden gegenereerd, en de ontwikkeling van het vaccin mislukt, en slechts 6 potentiële coronavirusvaccins gaan momenteel de klinische onderzoeksfase in, maar geen 1 effectief vaccin is goedgekeurd om in de handel te worden gebracht.

Openbaarmaking van de uitvinding

De uitvinding heeft tot doel een recombinant vaccin tegen het coronavirus te ontwikkelen. Een ander doel van de uitvinding is het verschaffen van een bereidingsmethode van het virus recombinant vaccin.

Gezien de verschillende problemen van de conventionele vaccins op dit ogenblik, hoe de problemen van de bestaande vaccins te veranderen en de immuunrespons te verbeteren is een probleem dat altijd wordt overwogen, om de immunocompetentie van het immunogeen te verbeteren en het immuunresponsvermogen van het lichaam te vergroten, is de meest fundamentele methode om het immunogeen met een hulpstof te mengen, en de immuunhulpstof is een promotor die de immuunrespons van het lichaam op het immunogeen kan verbeteren. CpG-oligodeoxynucleotide (ODN) is een veelbelovende hulpstof die de laatste jaren is ontdekt. CpG ODN blijkt een betere adjuvante activiteit te hebben in vivo, in vitro en klinische studies bij dieren, en de beste studies zijn CpG7909 en CpG 1018. 11/9.2017 is het door Dynavax Technologies van de Verenigde Staten van Amerika FDA goedgekeurde hepatitis B-vaccin met CpG1018 als adjuvans op de markt, het eerste goedgekeurde CpG ODN-adjuvansvaccin ter wereld en wordt gebruikt voor de preventie van HBV-infectie van volwassenen van 18 jaar en ouder, en een veelheid van verschillende soorten CpG ODN wordt gebruikt als adjuvans in een veelheid van klinische proeven. CpG wordt gecombineerd met TLR9 om onvolgroeide pDC-cellen te activeren en een natuurlijke en adaptieve immuunrespons te induceren, maar een enkele CpG-structuur heeft een beperkt activeringseffect op immuuncellen en wordt gemakkelijk snel gehydrolyseerd door exonuclease, zodat de stabiliteit van de CpG in vivo onvoldoende is, en er ook bijwerkingen worden veroorzaakt; CpG-oligodeoxynucleotide (ODN) gesynthetiseerd in de sequentie kan ook het stimuleringseffect versterken, en nadat het CpG is gekoppeld met andere eiwitten zoals antigen en dergelijke, wordt het CpG-oligodeoxynucleotide gecombineerd, zodat het CpG-oligodeoxynucleotide een zeer duidelijk immuunactiveringseffect heeft.

Grafeen is een tweedimensionaal koolstofnanomateriaal dat bestaat uit koolstofatomen in sp-gehybridiseerde orbitalen in een hexagonaal honingraatrooster. De fundamentele structurele eenheid van het materiaal is de meest stabiele zeshoekige benzeenring in het organische materiaal, en het materiaal is momenteel het meest ideale tweedimensionale materiaal. Grafeenoxide (GO) is een derivaat van grafeenoxide, en is een geëxfolieerd product. Wegens de kenmerken van unieke SP2 hybridisatie, een perfecte tweedimensionale structuur en een hoge reactiviteit van de rand, kan het behandelingsplatform dat op de hybride structuur wordt gebaseerd als ideale lading en entdrager in ontwerp en ontwikkeling worden gebruikt, en speelt het een belangrijke rol in aspecten van nano-drugsleveringssystemen, biologische opsporing, tumorbehandeling, celbeeldvorming en dergelijke.

De onderhavige uitvinding is voltooid op basis van de bovengenoemde studies.

De uitvinding onthult een gloednieuwe vaccinontwikkelingsmethode op basis van een grafeenoxidemateriaal dat dient als kader voor het laden van CpG-moleculen en recombinante eiwitten. Op basis van het technische platform wordt een nieuw nano-nieuwe coronavaccin bereid door het recombinante eiwit van de RBD-regio van het Spike-eiwit van het SAR-CoV-2 te combineren. Het bereide nano-nieuw kroonvaccin heeft een sterkere immunogeniciteit in muizenexperimenten en kan antilichamen met een hoge titer genereren.

In één aspect voorziet de uitvinding in een coronavirusvaccin dat bestaat uit grafeenoxide, carnosine, CpG en RBD. Bij voorkeur wordt het vaccin GO-Carnosine-CpG-RBD-vaccin genoemd.

Grafeenoxide (GO) is een oxide van grafeen, en na oxidatie worden zuurstofhoudende functionele groepen op het grafeenoxide vergroot, zodat het grafeenoxide actiever is dan grafeen. Zo zijn hydroxylgroepen en epoxygroepen willekeurig over een grafeenoxidemonoliet verdeeld, terwijl carboxylgroepen en carbonylgroepen aan de rand van de monoliet worden aangebracht. Gangbare commerciële producten van grafeenoxide bestaan in de vorm van poeder, vlokken en oplossingen, en zijn bruingeel van kleur.

Carnosine, bekend onder de wetenschappelijke naam β -alanyl-L-histidine, is een kristallijne vaste stof die bestaat uit een dipeptide bestaande uit twee aminozuren, β -alanine en L-histidine. Carnosine heeft een sterk antioxidatief vermogen, en kan Reactieve Zuurstofspecies (ROS) en alfa-bèta onverzadigde aldehyden, die worden gevormd door over-oxidatie van vetzuren in celmembranen tijdens oxidatieve stress, wegvangen.

CpG-motieven activeren het immuunsysteem van het lichaam en kunnen worden gebruikt als hulpstof. De CpG-coderingssequentie wordt bij voorkeur weergegeven als SEQ ID NO 1.

Het door de uitvinding beschreven coronavirusvaccin wordt verkregen door carnosine, CpG en een nieuw coronavirus-RBD te combineren op geactiveerd grafeenoxide.

De dosering van GO in het coronavirusvaccin dat door de uitvinding wordt verstrekt, wordt gebruikt als kaderbasis, de dosering is gewoonlijk buitensporig, en de dosering van carnosine kan ongeveer tweemaal die van GO zijn. CpG en het nieuwe coronavirus RBD worden gebruikt als biologische macromoleculen, en de dosering van het CpG en het nieuwe coronavirus RBD is minder, en is gewoonlijk één tienduizendste van dat van GO in massaverhouding. En RBD wordt gebruikt in een hoeveelheid meer dan 2 keer dat van CpG, zoals CpG: RBD = 1: 2-10, bij voorkeur, is de dosering van RBD 3-6 keer van dat van CpG.

In een ander aspect, verstrekt de onderhavige uitvinding een methode om het coronavirusvaccin te bereiden, de methode die de stappen omvat van:

het verkrijgen van CpG, RBD recombinant eiwit en carnosine;

In een voorkeursbelichaming van de onderhavige uitvinding is de verhouding van grafeenoxide, carnosine, CpG, en RBD: 26 mg: 40 mg: 1,2. mu.g: (3-6) μ g.

De reactietemperatuur bedraagt bij voorkeur 20-28 ℃. Er wordt bijvoorbeeld gebruik gemaakt van kamertemperatuur.

....

De uitvinding creëert een technisch platform voor de bereiding van nano-recombinant eiwitvaccins dat het menselijk immuunsysteem snel kan prikkelen en snel een grote hoeveelheid preventieve vaccins kan produceren nadat besmettelijke virussen zijn bevestigd. Het technische platform maakt volledig gebruik van het kenmerk dat het oppervlak van grafeenoxide voorzien is van COOH, hydroxyl en andere groepen, en maakt gebruik van de interactie tussen pi-pi bindingen om het gescreende RBD recombinante eiwit, CpG-moleculen en carnosine samen te voegen om het nano recombinante eiwitvaccin voor te bereiden op basis van het grafeenoxide als raamwerk. Het vaccin kan een organisme stimuleren om een hoog-titer RBD-neutraliserend antilichaam tegen SAR-CoV-2 aan te maken, en legt een technische basis voor de preventie en behandeling van coronavirusinfectie en toekomstige grote uitbraken van soortgelijke epidemieën.

In een ander aspect voorziet de uitvinding in een toepassing van het GO-Car-carnosine-CpG-RBD-vaccin, namelijk een toepassing van het GO-Car-carnosine-CpG-RBD-vaccin bij de bereiding van een geneesmiddel ter voorkoming van een nieuw coronavirus.

Deze patent aanvraag laat uitschijnen dat er nog geen grafeen oxide wordt gebruikt in vaccins. Niets is minder waar. Uit een Spaanse studie blijkt dat er een hoge dosis grafeen oxide in het Pfizer mRNA vaccin zit.

https://www.naturalhealth365.com/mrna-jabs-content-3898.html